Sreda Ploskirev (Bactoagar F): opis. Medicinska mikrobiologija

Okolje Ploskireva (imenovano tudi Bactoagar G) je hranilni medij

Zgodovina

Nikolai Ivanovich Ploskirev je sovjetski mikrobiolog in ugledni doktor RSFSR. Rojen je bil leta 1869 in umrl leta 1948, večino svojega življenja dela v rodnem mestu Tomsk.

Leta 1888 je on, bodoči znanstvenik, ni končal šestega razreda šole, vstopil v vojaško službo. Študij je končal šele leta 1892, po tem pa je opravil izpit za sprejem na Univerzo Imperial Tomsk, študiral na Medicinski fakulteti. Leta 1898 je prejel naziv zdravnika.

Ploskirev je sodeloval v rusko-japonski vojni, potem pa je delal v bolnišnici Tomsk. Leta 1910 je bil imenovan za vodjo Tomsk Dermatovenerološke bolnišnice in trideset let je bil njegov stalni vodja. Podobno je bil znanstvenik eden izmed ustanoviteljev dermatološkega in venereološkega dispanzerja v Tomsku.

Nikolai Ivanovich Ploskirev je napisal vrsto del, posvečenih boju proti spolnim boleznim.

Sestava

Sreda Ploskirev - material za gojenje črevesnih bakterij in zato mora vsebovati več vrst hranil. Proizvaja se v suhi obliki.

Pankreatični hidrolizat paprike (10,4 g / l) ima v svoji skupni masi precej velik delež. Nekoliko manj je potrebno za dinatrijev hidrogen citrat (8,5 g / l). Prav tako vsebuje suho hranilno juho in mlečni sladkor (8,62 in 7,3 g / l).

Drugo ime za okolje Ploskireva je Bactoagar J. Vsebuje agar v količini 6,94 g / l. Vsebnost brezvodnega natrijevega sulfata je 5,1 g / l. Obstaja dehidriran fosfat dinatrij - 2,1 g / l, natrijeve soli žolčnih kislin okoli 3,46 g / l in soda pepel - 2,4 g.

Manj gram vsebuje kazalnike - nevtralno rdeče (0,05) in briljantno zeleno (0,0002). Vsebnost joda je 0,13.

Uporaba

Študija biokemijskih procesov bakterij igra pomembno vlogo pri diagnostiki bolezni, ki povzročajo anaerobne organizme. Vrste, ki sestavljajo to družino, so stotine. So skoraj identični v morfoloških in kulturnih lastnostih, najbolj zanesljiv način za njihovo razlikovanje pa je preučevanje biokemije.

Študija se začne z setvijo patološkega materiala v hranilnem mediju. Je diferencialno patološko za črevesno skupino bakterij, njegova sestava pa poleg agarnega agarja vsebuje tudi indikator in laktozo. Sposobnost obdelave laktoze je pomemben znak diferenciacije enterobakterij. Če je to zaznano, se pH premakne v smeri kislosti in sproži indikator, ki obarva kolonijo.

V drugih državah se lahko uporabljajo drugi hranilni mediji, vendar mehanizem njihovega delovanja ustreza trem najpogostejšim v Rusiji - okolju okolja Endo, Levin in Ploskirev.

Opis metode

V tujini je ekvivalent Ploskirevovega okolja tako imenovani MacConkey Agar. V končani obliki je raztopina prozorna, ima svetlo rožnato rumen odtenek. Kolonije, sposobne predelave laktoze v mediju Ploskireva, so rdeče (brusnična) barva. Če bakterija ne more predelati, je kolonija brezbarvna ali šibka.

Glede na to, da sestava okolja Ploskirev vključuje snovi, ki zavirajo (diamantno zelena, žolčne soli, jod), praktično povsem zavira rast Gram-pozitivne flore in v prvem dnevu močno zavira rast eshechirije in druge pogosto spremljajoče mikroflore.

Druga stopnja

Nato se odvija izbor kolonije zanimanja, ki je posejana s primarnim diferencialnim in akumulacijskim medijem. Mediji, na katerih poteka sejanje, morajo vsebovati več substratov. Bakterijska kultura mora zaznati encimatsko aktivnost proti njima, poleg medija pa se nahajajo v epruvetah, tako da obstajata dva dela:

• tisti, na katerem je agar nagnjen;
• s stolpcem.

Kolonije, ki zanimajo raziskovalca, naselijo na nagnjeni del z gosto kapjo, v stolpcu pa s krtačo. Na tej stopnji se uporabljajo mediji Russell, Kligler ali Olkenitsky. Kot diferencialna diagnostika se uporablja tudi Ploskirevov medij.

Mikrobiologija in patogeni

Ploskirevov agar je pomemben dejavnik pri odkrivanju okužb, ki jih povzročajo enterobakterije. Tako na primer raste in razločuje kolonije mikroorganizmov, ki so povzročitelji bakterijske dysentery. To so anaerobni organizmi, ki vstopajo v rodu Schigella.

Kot vsi, ki so del družine črevesnih bakterij, so Shigella vrsta palic, velikosti dveh mikrometrov. Ne tvorijo kapsul in spor, nimajo flagella - to jim omogoča, da se razlikujejo od salmonele, ki je nato mobilna. Odlično rastejo na najpreprostejših okoljih, pri temperaturi tik nad sobno temperaturo (35-37 ° C) in 7,4 pH. Po naravi rasti se kolonije ne razlikujejo od salmonele.

Kot je navedeno zgoraj, mikroorganizmi nimajo praktično nobenih morfoloških razlik, vendar se bistveno razlikujejo po biokemijskih procesih vitalne aktivnosti. Torej, razen Shigella Newcastle, fermentacija ogljikovih hidratov je tvorba kisline brez plina. Z izjemo šigele Sonne ne morejo fermentirati laktoze, ampak razgradijo glukozo. Samo na njihove ključne značilnosti je mogoče pripisati dejstvu, da lahko zmanjšajo nirvost na nitrit. Njihove kolonije ne cepijo sečnine, v hranilnem mediju pa ni utekočinjenja želatine.

Zbiranje in priprava inokuluma

Za odkrivanje patogenov dysenterije so potrebne mikrobiološke študije okuženih medijev, to je pacientovih črevesnih gibov. Po prejemu materiala je treba posejati čim prej. Če to ni mogoče, je treba vir dati v konzervans - mešanico fosfatnega puferja ali glicerin. Pri temperaturi 4 ° C jih lahko shranite samo za en dan. Zbiranje materiala je treba opraviti z rektalno stekleno cevko, ki se vstavi v rektum.

Za preiskavo materiala se izberejo gnojne sluznice, ki jih je potrebno sprati v dveh ali treh epruvetah izotonične raztopine natrijevega klorida.

Uporaba patogenih bakterij na medij Ploskireva je izdelana s stekleno lopatico. V majhnem predelu je potrebno, da ga potresemo v agar, nato pa odtrgamo lopatico iz medija, preostali material pa pregibamo v nezaprti površini. Če se setev opravi v več skodelicah, je treba vsakega od njih posejati z novim deležem.

Če mukopurentni kosi ne obstajajo v izločeni obliki za analizo, to ne pomeni, da tam ni prisotnih patogenih mikroorganizmov. V tem primeru je treba emulirati blato v 10 ml raztopine natrijevega klorida (koncentracija 0,85%), nato pa posejati eno ali dve kapljici na ploskirevovem mediju. Emulzijsko blato se lahko posejamo v sestoju iz selenita. Uporablja se tudi, če je namesto blata bruhana ali prana.

Mikrobiološka diagnostika

Na prvi stopnji mikrobioloških raziskav se patogene bakterije zasejejo v dve skodelici, nato pa opazujejo, kako raste šigela. Na mediju Ploskireva se prideluje ena pridelka, druga pa na Levinu ali Endujevem mediju.

Glede na nastanek sevov Shigella, odpornih na antibiotike, se medijev dodaja levomicetin. Nato v 24 urah inkubacija poteka v termostatu pri temperaturi 37 ° C.

Drugi dan morate preučiti odrasle kolonije. Tisti, ki ne rastejo brezbarvno v diferencialnem diagnostičnem okolju, morajo biti odtečeni v Russellov medij ali v kratki seriji "motive". Nadaljnje raziskave se izvajajo v skladu z algoritmom primarnih poljščin na njih. Kolonije shigele na ploskirevovem mediju rastejo v obliki prozornih, brezbarvnih in majhnih stebrov. Imajo dve vrsti:

• sploščena z robovi;
• Zaokrožen, konveksen, z značilnim vlažnim sijajem.

Tri ali štiri kolonije je treba mikroskopirati in preučiti za mobilnost. Če slednjega ni mogoče najti, se premaknejo v okolje Olkenitskega, da bi izločili čisto kulturo. V odsotnosti značilnih kolonij šigele ali če sploh ni rasti, je treba na Endo ali Ploskirev agaru proizvesti juho iz selenita. Če so v zadostnih količinah prisotne značilne kolonije, se doda približna aglutinacijska reakcija. Uporabili smo mešanico sera Sonne in Flexner, reakcija poteka na steklu.

Nadaljnje raziskave

Na tretji dan, so spremembe, ki so se pojavili v kolonijah na mediju Russell je. Če je kultura, ki ne škoduje laktoze in glukoze fermentira, da dobimo kislino, jo ločimo in analizirali, preživijo mikroskopijo, kot tudi izvede sejanje v "pisana vrstici", vendar tokrat razširjen. Enako se opravi test aglutinacije za namene serološke identifikacije.

Zadnji dan lahko zaključite na podlagi sprememb v "seriji motenj" (ali poteka fermentacija ogljikovih hidratov), ​​kot tudi rezultati reakcije aglutinacije.

Skladiščenje in priprava

Priprava Ploskirev agarja je naslednja:

1. 55 g suhe snovi mešamo v liter destilirane vode.
2. Vreli dve do tri minute, dokler se agar popolnoma ne stopi.
3. Nalijte v petrijevke (sterilnost je neobvezna) s plastjo 5-6 mm.
4. Skodelice pustite odprto eno uro in pol pri sobni temperaturi (18-25 stopinj). Ob koncu tega časa se medij zamrzne in osuši dovolj.

Okolje Ploskireva je svetlobno občutljivo in higroskopsko. Prašek mora biti shranjen v zaprti embalaži, relativna vlažnost zraka v prostoru ne sme presegati 60%. Optimalna temperatura shranjevanja od 2 ° C do 25 ° C. Upoštevati je treba ta pravila shranjevanja, sicer se lahko pojavijo netočni rezultati raziskav.