Radioimunska analiza v mikrobiologiji: aplikacija, mehanizem

Sodobna medicina ima posebne metode diagnosticiranja, ki omogočajo, da nastavite etiologije bolezni, ki temeljijo na določanju patogena gensko tuje snovi, ki stimulirajo imunski odziv, nukleinske kisline ljudi, pa tudi premiki na imunski in alergijske narave, ki nastane zaradi svojega delovanja. Danes se RIA pogosto uporablja v imunologiji in virologiji, to je radioimmunoznanosti, ciljih formulacije, komponentah, ki jih obravnavamo v tem članku. Ta test lahko zazna antigene kot posledico njihove interakcije s protitelesi.

Opredelitev

RIA je metoda diagnosticiranja takšne biološko aktivne snovi v telesnih tekočinah, ki temelji na antigen-protitelo reakcijo z uporabo, radionuklidno označenih spojin analogno z njim, ki imajo specifično vezavno sistem. Po njihovem medsebojnem delovanju se oblikuje imunski kompleks, ki je ločen in preučen zaradi njegove radioaktivnosti. To je znano radioimunsko testiranje se izvaja s standardnimi kompleti reagenta.

Vsak reagent lahko določi koncentracijo posamezne snovi. Biološko tekočine vzete iz človeku se zmeša z reagentom po inkubaciji ločitev prost in vezan radioaktivni material nadalje izvedemo radiometrija in izračun rezultatov. Za označevanje snovi se uporablja izotop joda. Označena in dodana v določeni količini.

Uporaba

Aplikacija radioimunskega testa ima široko medicino in mikrobiologijo. Z njeno pomočjo se izvaja diagnoza srčnih in žilnih bolezni, bolezni endokrinih in drugih telesnih sistemov. Prav tako se RIA pogosto uporablja za prepoznavanje vzroka neplodnosti, patologije razvoja ploda. V onkologiji se ta analiza izvaja za določanje označevalcev neoplazem, da bi lahko spremljali učinkovitost zdravljenja. V imunologiji se RIA uporablja za preučevanje prisotnosti imunoglobulinov, encimov, beljakovin in tako naprej v krvi. Danes ta analiza vam omogoča, da določite koncentracijo različnih hormonov na milijonski del en gram. Na ta način, radioimunsko testiranjeki se pogosto uporablja v kardiologiji, onkologiji, endokrinologiji, ginekologiji in virologiji.

RIA metode

Priznano je, da se razlikujejo različne analitske metode, odvisno od narave reakcije:

1. Nekonkurenčna metoda so značilne takšne reakcijske komponente kot standardni in zaznavni antigeni, puferska raztopina, protitelesa, označena z izotopom, določena protitelesa, ki se vežejo na sorbent. Protitelesa, ki se proučuje, se doda antigen. Po inkubaciji se pojavijo kompleksi antigenov in protiteles, sorbent izperemo, dodamo označena protitelesa, ki se vežejo na antigen v kompleksu. Radioaktivnost je odvisna od koncentracije antigena, ki je raziskana.
2. Konkurenčni radioimunski preskus je posledica konkurence antigenov. Obstajajo reakcijske komponente kot so nadzor in opredeljenih antigenov, pufrske raztopine, specifičnih protiteles, ki se vežejo na sorbent, kot tudi antigen označeni izotopa. Diagnoza se začne z injiciranjem antigena, ki se preiskuje. Na sorbentu se tvori kompleks antigena-protitelesa. Nato sorbent izperemo in vnesemo označeni antigen. V tem primeru pride v stik s protitelesom. Z števci se izmeri reakcija in radioaktivnost. To bo v obratnem sorazmerju z količino antigena v vzorcu.
3. Posredna metoda je najpogostejši. V tem primeru radioimunska analiza sestavin Reakcija ima kot kontrolni in testni serum, antigeni ali protitelesa, ki so vezani na sorbent, protitelesa, označena z izotopi, puferske raztopine. Protitelesa ali antigeni, ki so diagnosticirani, reagirajo z antigeni ali protitelesi, ki so vezani na sorbent. Nato se inkubat odstrani, uvedejo se označena protitelesa, ki se vežejo na kompleks antigen-protiteles.

Metoda analize

Torej se radioimunska analiza izvaja s pomočjo posebnih reagentov. Kompleti so standardni, tako da morebitne napake ali nepravilnosti niso dovoljene. Rezultati diagnoze so zanesljivi. Analiza se izvaja zjutraj, v ta namen oseba venska krv. V laboratoriju je serum ločen od krvi, ki se bo uporabljal za RIA. Ta serum se zmeša z reagenti. Dobljeno zmes inkubiramo pri dani temperaturi v termostatu.

Dobljeno zmes ločimo s prostimi in vezanimi izotopi. Po tem se preučuje prejeto gradivo in rezultati se izračunajo. Mehanizem radioimunskega testa ima več različic. Opisani postopek je tekoča faza RIA, saj imajo vse komponente tekoče stanje. Obstajajo RIA in trdna faza, kjer se protitelesa dajo v nosilec, ki se v tekočini ne raztopi.

Razpoložljivost diagnostike

Uporaba tega načina diagnoze v medicini vsako leto postaja vse bolj priljubljena. V zadnjem času, radioimunsko testiranje postane standardna metoda diagnoze, ki jo lahko določi zdravnik pri zaključni diagnozi. Ta vrsta analize je že dolgo potekala le v laboratorijih, danes pa je postala navadna metoda raziskovanja. Toda RIA zahteva uporabo drage opreme (gama-števci), in sklopi reagentov imajo kratko obratovalno obdobje. Vse to je glavna pomanjkljivost takšne analize, ki določa njegove drage stroške.

Poleg tega je v zadnjem času RIA začela izničevati sodobnejše raziskovalne metode, ki ne zahtevajo interakcije z izotopi. Takšne skrbi imunski test encimov. Tako je RIA dobrodošla v številnih klinikih. V velikih mestih in diagnostičnih centrih se je že dolgo uporabljala, toda v rednih bolnišnicah v majhnih mestih ta analiza skoraj ni porabljena zaradi visokih stroškov.

Prednosti RIA

Radioimunska analiza ima veliko prednosti. To je precej specifično in ima visoko občutljivost, kar omogoča ugotavljanje prisotnosti biološko aktivnih snovi v neverjetno majhnih količinah. Ta analiza je zelo preprosta, oseba mora le prenesti vensko kri. Rezultati testa so 100% natančni in pripravljeni naslednji dan. Tudi RIA se lahko brez težav avtomatizira. Tako ta analiza nam omogoča, da identificiramo beljakovine, ki so produkti vitalne aktivnosti infekcijskih bakterij, kar kaže na prisotnost okužbe v telesu.

Diagnoza v virologiji

Najbolj obetavna RIA je za virologijo, ker v kratkem času omogoča odkrivanje virusnih patogenov. To je posledica dejstva, da se v zadnjem času povečuje pogostost različnih okužb, ki se hitro širijo in povzročajo smrt med ljudmi. To še posebej velja za države, ki nimajo visokega socialnega in gospodarskega razvoja (Daljni vzhod), je tu preprosto nenadomestljivo radioimunsko testiranje. Mikrobiologija Ta diagnostična metoda uporablja tudi za odkrivanje nalezljivih bolezni, ki povzročajo patogene bakterije. Na primer, RIA se pogosto uporablja za odkrivanje tifusne kuge. V prvih dneh bolezni pred imenovanjem je potrebno opraviti študijo blata in bruhanja. Vendar pa bodo rezultati diagnoze doseženi po dolgem času. Tu se RIA spravi v reševanje, analiza omogoča, da v kratkem času prepoznamo patogen bolezni. Oseba daje krvi, naslednji dan so rezultati študije že pripravljeni. Ta analiza pomaga pri oblikovanju natančne diagnoze.

Rezultati

Radioimmunoznanost je trenutno ena najobčutljivejših metod diagnoze. Uporablja se za analizo vsake snovi, proti kateri se protitelesa lahko proizvedejo. Ta metoda omogoča izdelavo veliko vzorcev v najmanjšem volumnu tekočine, ki se preiskuje, in tudi za zapisovanje rezultatov v najkrajšem možnem času, saj je lahko popolnoma avtomatiziran. To analizo je v petdesetih letih prejšnjega stoletja razvil Solomon Berson. Trideset let kasneje je postal zelo razširjen. Do danes RIA nima 100% alternativ, saj ima analiza visoko občutljivost. RIA se uporablja v različnih panogah, pa tudi v mikrobiologiji in virologiji.

Končno

Uporaba metode v virologiji je zelo pomembna danes, saj ponuja možnost raziskovanja širjenja okužb, natančne diagnoze in predpisovanja specifičnega zdravljenja. Še posebej je ta problem pomemben za države, ki imajo nizko stopnjo gospodarstva in družbenega razvoja. Tudi ta analiza vam omogoča, da določite število hormonov in encimov v človeškem telesu. Za pridobitev zanesljivih rezultatov mora preiskovalec le za krmo nameniti analizo. Medicina ne stoji mirno, skupaj z radioimmuno analizami se pojavijo nove metode raziskovanja, vendar RIA še naprej ostaja vodilna v medicinski diagnostiki.