Tinktorske lastnosti - osnova mikroskopije bakterij

Raznolikost bakterijskih okužb zahteva jasno identifikacijo patogena in opredelitev njene vrste. Določite vrsto mikrobiologov mikroorganizmov, ki so jim pomagale tinktorične lastnosti - občutljivost mikrobov na obarvanje z različnimi barvili. Ta metoda vam omogoča raziskovanje morfologije patogena. Tinktorska lastnost bakterij je zelo pomembna za praktične in teoretične raziskave na področju mikrobiologije.

Preiskava mikrobov

V bakteriologiji obstaja veliko metod za obarvanje mikroorganizmov. Vsi so zasnovani na tinktorialnih lastnostih bakterij. Barvanje vam omogoča, da določite njihovo obliko, strukturo, velikost, relativni položaj. To omogoča reševanje problemov sistematizacije mikroorganizmov splošne biologije in primerjalne mikrobiologije.

Zakaj jih barva?

Bakterije so praktično prozorni organizmi in brez uporabe madežev so slabo vidne za navadno mikroskopijo. Za preučevanje predmetov lahko uporabite posebne vrste mikroskopije (fazni kontrast, v temnem polju), vendar je najlažja poteza barve, po kateri se bakterije vidijo v običajnem svetlobnem mikroskopu.

Priprava vzorca

Ne glede na uporabljeno barvno tehniko obstajajo enotna pravila za pripravo predmeta, ki se preučuje. Obvezne so naslednje faze:

• Sterilni instrumenti na drsniku brusijo.
• Vzorec posušimo. To se naredi pri sobni temperaturi ali pri uporabi sušilnih omar.
• Nato sledi stopnji fiksacije - mikroorganizmi se s stekleno kremo pripnejo s posebnimi sestavki.
• Dejansko obarvanje - vzorec je prekrit z barvilom v določenem časovnem obdobju, po katerem se opere.
• Končno sušenje - vzorec se ponovno posuši.
  

Najpogostejša barvila

Najpogosteje uporabljane barve na osnovi anilina z različnimi kislinskimi vrednostmi (pH). Večina barvil je prah, ki se goji v alkoholu.

Barvila, v kateri so barvila kationi, imenujemo osnovni (pH večji od 7). Uporabljajo se lahko za madež mikroorganizme rdeče (magenta, safranina), vijolična (metilviolet, tionin), modra (metilen modro), zelena (malahitno zelenega), rjava (pridobitev chrysoidine) in črne (indulin) barve.

Barvila, v katerih so barvila anion, imenujemo kisla (pH manj kot 7). Obarvali bodo vzorec v rdeči (eozin), rumeni (pikrin) ali črni (nigrosin) barvi.

Obstaja skupina nevtralnih barvil (npr. Rodamin B), kjer so barvila kationi in anioni.

Kultura živa ali mrtva

Metode obarvanja so razdeljene v dve skupini glede na življenjsko obliko preskusnega vzorca.

• Vitalno (intravitalno) barvanje. Ta metoda proučevanja lastnosti mikroorganizmov se uporablja pri študiji živih tkiv, kar omogoča opazovanje življenjskih procesov mikrobov. Za takšno obarvanje se uporabljajo barve z nizko toksičnostjo in visoko prodorno močjo.
• Postestralno obarvanje. To je obarvanje mrtvih ali uničenih mikroorganizmov. Zaradi tinktikalnih lastnosti bakterij mikrobiologi določajo njihovo strukturo. Ta obarvanost se najbolj uporablja.

Gram-pozitivna in gram-negativna

Te značilnosti bakterij, ki jih najdete v navodilih za razna zdravila. Ta metoda proučevanja tinktorialnih lastnosti bakterij temelji na uporabi encijanskega vijoličastega barvila in fiksacije z jodom. To je tehnika Hans Christian Gram, danski zdravnik, ki jo je predlagal leta 1884. Zaradi tega madežev so bakterije razdeljene v dve skupini:

• Gram (+) - obarvani modri (stafilokoki in streptokoki).
• Gram (-) - so obarvani v barvi od rožnatega do rdečega (enterobakterija, salmonela, E. coli).

Zaradi neenakih tinkturnih lastnosti bakterijskih sten se pridobi drugačen rezultat obarvanja. Metoda barvanja Gram in danes je glavna pri diagnostiki nekaterih nalezljivih bolezni.

Druge metode barvanja

Opišite značilnosti več drugih metod, ki se pogosto uporabljajo v bakteriologiji.

• Metoda Tsilya-Nelson - določa kislinsko odpornost bakterij. Identificira povzročitelje tuberkuloze in mikobakterijeze.
• Metodologija Romanovsky-Giemsa - madež acidophilus (ocetna kislina in mlečna kislina) bakterije v rdečih in bazofilcev (spirohete in praživali) - modro.
• Morozovova metoda - madeže bakterije v rjavi barvi in ​​naredi njihovo flagelo vidno.

Spore lahko vidite

Obarvanje z fucinom Zilya omogoča spore bakterij. Po barvanju imajo rožnato barvo, so jasno vidni v ozadju modrih bakterij. Ta metoda je tudi instrument bakteriologije in je zelo praktičen pomen.